Как выполнять серийные разведения

Содержание

• этапы
• Способ 1 Выполните простое разбавление
• Метод 2 Рассчитать конечный коэффициент разбавления и концентрацию

В химии разбавление состоит в снижении концентрации данного раствора. Последовательное разбавление - это просто повторное разбавление исходного раствора для быстрого усиления фактора разбавления. Этот тип разбавления часто выполняется во время экспериментов, требующих сильно разбавленных растворов и высокой точности, таких как те, которые включают кривые концентрации в логарифмическом масштабе или те, которые позволяют рассчитать плотность бактерий в определенных средах. Они очень часто выполняются в биохимии, микробиологии, фармакологии или химии.

этапы

Способ 1 Выполните простое разбавление

1. 
   

   
   Определите правильную разбавляющую жидкость (или разбавитель). Выбор разбавителя очень важен и зависит от раствора, который вы хотите разбавить. Разбавителем часто является дистиллированная вода, но она не является систематической. Таким образом, с раствором, содержащим бактерии или клетки, вместо этого используется культуральная среда. Для серийного разбавления один и тот же разбавитель используется во всех пробирках.
   • Если вы не уверены, какой разбавитель использовать, обратитесь за помощью к компетентному специалисту или поищите в Интернете то, что люди должны сделать для такого же опыта.

2. 
   

   
   Подготовьте несколько пробирок, содержащих 9 мл разбавляющей жидкости. Эти пробирки будут использоваться для последовательных разведений. Принцип прост: вы берете образец исходного раствора и переносите его в следующую пробирку, затем берете пробу этой пробирки, чтобы поместить ее в следующую, и т. Д.
   • Перед началом разведений желательно заранее определить пробирки, чтобы потом не перепутать.
   • В каждой пробирке концентрация будет на десять ниже, чем в предыдущей. Первая пробирка будет содержать разбавленный раствор в десятой, второй, сотой, третьей, тысячной и т. Д. Заранее определите количество разведений, чтобы избежать создания пробирок больше, чем необходимо, и разбавлять ненужные разбавители.

3. 
   

   
   
   
   Подготовьте пробирку с материнским раствором. Положите минимум 2 мл. Минимальное количество исходного раствора для серийного разведения составляет один миллилитр. Разрешить 2 мл для возможного второго разведения. Эта трубка материнского раствора, вы можете пометить его как «СМ».
   • Перед началом серийного разбавления хорошо перемешайте исходный раствор.

4. 
   

   
   Сделайте первое разведение. Пипетируйте 1 мл исходного раствора в пробирку с надписью «SM» и перенесите это количество в помеченную пробирку. 1/10 который уже содержит 9 мл разбавляющей жидкости. Смешайте до получения однородного раствора. В этой пробирке теперь 10 мл раствора: 1 мл исходного раствора и 9 мл разбавляющей жидкости. Это новое решение в десять раз менее концентрированное, чем предыдущее.

5. 
   

   
   
   
   Выполните второе разбавление. Во втором серийном разведении вы будете использовать 1 мл раствора для маркированной пробирки. 1/10 и выльете это в трубу 1/100 который уже содержит 9 мл разбавляющей жидкости. Трубка 1/10 будет хорошо перемешан перед отбором проб. Как только передача сделана, хорошо перемешайте пробирку 1/100, Раствор из маркированной трубки 1/10 в 10 раз более концентрированный, чем у маркированной трубки 1/100.

6. 
   

   
   Повторите эту манипуляцию при необходимости. Эту процедуру можно повторять столько раз, сколько необходимо, пока не будет достигнуто желаемое разбавление. Таким образом, для эксперимента с кривыми концентрации можно получить серию растворов с разведениями на единицу, десятую (1/10), сотую (1/100) или тысячную (1/1000).

Метод 2 Рассчитать конечный коэффициент разбавления и концентрацию

1. 
   

   
   Рассчитать соотношение окончательное разведение после серийного разведения. Общий коэффициент разбавления получается путем умножения коэффициента разведения на себя столько раз, сколько разведения. Математически формула выглядит следующим образом: D_T = D₁ х D₂ х D₃ х ... х д_Nс D_T представляющий общий коэффициент разбавления и D_NКоэффициент разбавления.
   • Итак, давайте предположим, что вы выполняете разведение жидкости 1/10 4 раза подряд. В формуле замените коэффициент разбавления на его значение: D_T = 10 х 10 х 10 х 10 = 10000
   • Конечный коэффициент разведения четвертой пробирки в вашем серийном разведении составляет 1/10 000. Концентрация раствора последней пробирки теперь в 10 000 раз ниже концентрации исходного раствора.

2. 
   

   
   Определите концентрацию раствора после разбавления. Чтобы определить конечную концентрацию раствора после серийного разбавления, необходимо знать начальную концентрацию. Формула тогда: С_{окончательный} = C_{начальная}/ Aс С_{окончательный} представляющий конечную концентрацию разбавленного раствора, С_{начальная}концентрация исходного раствора и DКоэффициент разбавления определяется заранее.
   • Итак, если вы разбавите раствор клеток с концентрацией 1000000 клеток на мл и ваш коэффициент разбавления будет установлен на 1000, какова будет конечная концентрация вашего разбавленного образца?
   • Используйте формулу:
     • С_{окончательный} = C_{начальная}/ A
     • С_{окончательный} = 1 000 000/1 000
     • С_{окончательный} = 1000 кл / мл

3. 
   

   
   Обратите внимание на используемые единицы. При выполнении ваших расчетов всегда проверяйте, что вы используете одни и те же единицы измерения. Таким образом, если вы начнете с концентрации клеток на мл, ваш конечный результат также будет в клетках на мл. Если ваша начальная концентрация в частях на миллион (ppm), ваша конечная концентрация будет в частях на миллион.